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【学术分享】《人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究》_莱菲得LIFEADE_纯参原

【学术分享】《人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究》_莱菲得LIFEADE_纯参原

发布时间:
2021/06/02
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《人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究》

注:人参皂甙(dài)即人参皂苷(gān )。

研究文献来源:《第二军医大学学报》

作者:高 勇,王杰军,许 青,叶琴琴,郭 静,耿怀成 (第二军医大学长征医院肿瘤科,上海200003) 

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目的:探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤生长的作用机制。

方法:利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)观察Rg3作用后肿瘤新生血管的生长情况,并采用Lewis肺癌模型进一步探讨Rg3在体内对肿瘤生长及肿瘤新生血管形成的影响。

结论:人参皂甙Rg3可明显抑制Lewis肺癌的生长,其抑瘤作用部分是因为抑制了肿瘤诱导的新生血管形成。

文献节选:

“新生血管形成是实体瘤快速增长所必需的先决条件之一。一方面,新生血管可以为肿瘤细胞带来丰富的氧气和养料,并将废物带走;另一方面,肿瘤细胞可以通过新生的血管向远处转移。因此,探讨肿瘤新生血管形成机制已成为目前肿瘤研究领域的又一个重要课题。研究表明,血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是刺激血管内皮细胞增殖、迁移和形成血管的两个最主要的因子;通过药物抑制肿瘤新生血管的形成可有效控制恶性肿瘤的生长和远处转移。

Rg3是人参皂甙内的一个重要成分,在体内具有明显的抑瘤作用。本研究通过体外鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验和荷瘤小鼠体内实验,进一步探讨了Rg3的抗肿瘤作用机制。

1材料和方法

l.l 材料

Rg3由大连天富制药有限公司富力博士赠送,系从我国所产的东北红参中提取﹐纯度>99.5% ,粉剂溶于二甲基亚矾(DM SO)中,常温保存。使用前用RPM I 1640配制成l0mmol/L(用于CMA实验)或10mg /ml(用于动物实验), DM SO终浓度<0.1%。鸡胚由上海市大江养鸡场提供。Lcwis肺癌小鼠由上海市医药工业研究所提供。苏拉明(su ram in)购自Sigma公司。实验动物为C57BL/6小鼠,由中科动管会提供,雌性,体质量19-2lg。

l.2 方法

l.2.l CAM实验

参照Pctcr等介绍的方法略加改进。取第7天的鸡胚,通过光照找到胚头,用手钻轻轻剥去直径为lcm大小的蛋壳;同时在鸡胚气室处钻一小孔,负压吸引,使得剥去蛋壳的地方形成一个人工气室;小心去除壳膜,暴露CAM。将浸泡过一定浓度药物的滤纸轻轻置于CAM 上。实验分组情况如下:空白对照组仅含(0.1% DM SO),用药组分为0.l和0.5mmol/L Rg3两亚组。每组6个鸡胚。最后,用伤口膜封注缺口,放入恒温箱内培养,培养条件37℃、湿度70%。以上操作均在超净台内进行。3d后取出鸡胚,局部采用丙酮和无水乙醇固定l0min,剪下放有滤纸的CAM﹐去除滤纸。在解剖显微镜下随机选取5个视野计数滤纸区域内可见血管的分支点数量,计算血管生长指数。

l.2.2 动物实验

取生长良好的Lcwis肺癌小鼠肿瘤组织,用生理盐水以l∶5的比例匀浆制备成细胞悬液,每只小鼠腋部皮下接种0.2ml后进行随机分组。设生理盐水对照组和环磷酰胺(CTX)阳性对照组(100m g/kg,分别于接种后第1、5、9、13、17天腹腔内给药);Rg3设5、10、20mg/kg给药组,给药体积为0.5m l/只,自接种次日起隔天灌胃一次,共给药10次。接种后第20天﹐脱颈处死动物,解剖取出瘤块,称质量,计算肿瘤生长抑制率。

l.2.3 肿瘤诱导的新生血管计数 

参考Krcislc和Lrsh lcr的方法,并进行部分改进:对荷瘤小鼠Rg3口服给药1周后,静注l%伊文蓝溶液后迅速处死小鼠,取出瘤体,在解剖显微镜下计数朝瘤体方向生长的血管。

l.3 统计学处理   

采用SPss7.0统计软件,进行方差分析。

2 结果
2.1 Rg3抑制CAM血管形成与对照组相比,Rg3浓度为0.1和0.5mmol/L时,可观察到CAM血管形成受到明显抑制(图l)。与未处理的CAM血管生长情况比较,对照组、Rg3 0.lmmol/L组与0.5mmol/L组血管生长指数分别为(91.l±8.2)% 、(62.4士9.3)% 、(45.6士5.7)%。Rg3组与空白对照组比较差异非常显著(p<0.01)。

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2.2 Rg3对Lcwis肺癌瘤体生长的抑制作用

5组小鼠接种后经不同的处理,20d后各组小鼠肿瘤生长情况见表l。结果与空白对照组比较,CTX组及Rg3组肿瘤生长明显受到抑制(p<0.01)。

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2.3 Rg3对Lcwis肺癌诱导的新生血管抑制作用

Rg3对肿瘤诱导的新生血管形成有明显的抑制作用,与对照苏拉明组比较,相差不显著(表2)。

 

莱菲得 纯参原 生命原 LIFEADE 人参皂苷Rh2 人参皂苷Rg3 稀有人参皂苷含100%3 讨 论

人参皂甙Rg3是存在于中药人参中的四环三萜皂甙,其分子式为C42H72O13。研究表明,人参皂甙Rg3体外对小鼠腹水肝癌细胞(MM1)、黑素瘤B16FE7细胞、人小细胞肺癌细胞(OC210)和人胰腺癌细胞(PSN21)的浸润具有较强的抑制作用,而结构相似的同系物人参皂甙Rb2及20(R)2Rg2的抗浸润作用较弱,人参皂甙Rh1、Rh2、20(R)2Rh1、Rb1、Rc和Re均无抗浸润活性。人参皂甙Rg3对高转移性的小鼠黑素瘤细胞(B16FE17)肺转移BALB/c小鼠结肠癌细胞(262M3.1)肺转移具有抑制作用,其抗肿瘤转移的作用与其抑制肿瘤细胞浸润、粘附和抗新生血管形成的活性有关。

动物实验进一步证实:Rg3可显著抑制大鼠大肠癌腹膜转移。人参皂甙Rg3能明显提高正常小鼠及荷瘤小鼠的免疫功能,与放、化疗合用有明显的减毒增效作用,可延长荷瘤宿主的生存期,毒理学研究未显示其有明显毒性。本研究结果表明,Rg3对Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用,抑瘤率随着用药剂量的增加而加强。

转移是恶性肿瘤恶性程度的主要标志,而血管形成被认为是肿瘤转移的一个主要步骤,因此,抗肿瘤新生血管形成已成为目前肿瘤防治研究中的一个热点。肿瘤新生血管形成是血管内皮细胞在肿瘤细胞及浸润的淋巴细胞分泌的许多细胞生长因子的调节下增殖、迁移及小管形成的过程。这些生长因子中最主要的是VEGF和bFGF。我们在研究中发现,人参皂甙Rg3抑制Lewis肺癌瘤体生长的同时,对肿瘤诱导的新生血管形成同样有明显的抑制作用。苏拉明是最早研究的抗肿瘤新生血管形成的药物之一,其抗新生血管活性是通过抑制bFGF产生而发挥作用的。

本研究结果表明,Rg3同样具有与苏拉明类似的抗新生血管作用。此外,我们采用CAM实验观察到Rg3对CAM血管形成具有明显的抑制作用,更是直接证实Rg3具有抗新生血管形成的作用。研究结果表明,Rg3可明显抑制Lewis肺癌的生长,其抑瘤作用可能部分是因为通过抑制了肿瘤诱导的新生血管形成而发挥作用。”

文献内容来源:中国知网

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